LightCycler® HybProbes: Precisão aliada à fiabilidade

Desenhadas para aplicações que exigem o mais elevado grau de especificidade e baixo ruído de fundo, as LightCycler® HybProbes são amplamente utilizadas em investigção e diagnóstico para a deteção de SNPs e mutações pontuais de elevada complexidade.

O sistema LightCycler® HybProbe baseia-se no princípio de FRET (Förster resonance energy transfer) e consiste em dois oligonucleotídeos marcados que hibridizam numa configuração cabeça-cauda ​​a sequências adjacentes do DNA-alvo. A sonda dadora é marcada na extremidade 3′ com um fluoróforo dador (fluoresceína) e a sonda recetora é marcada na extremidade 5′ com um fluoróforo recetor (por exemplo, LightCycler Red 640).

Quando ambas as sondas hibridizam de forma adjacente no DNA-alvo, a sua proximidade permite o FRET, resultando num sinal de fluorescência altamente específico durante a fase de annealing.

Graças ao seu mecanismo único baseado em FRET, as LightCycler® HybProbes permitem a análise da curva de melting pós-PCR, permitindo a deteção precisa de SNPs e mutações em sequências muito semelhantes.

Aplicações:

• Genotipagem de SNPs e Detecção de Mutações;
• Quantificação em tempo real;
• Deteção e vericação de agentes patogénicos;
• Ensaios multiplex.

As LC®probes estão disponíveis em 7 escalas diferentes com quantidades molares definidas.

Oferecemos LC®probes com comprimento máximo de 40 nucleotídeos, com quantidades de entrega garantidas entre 1 e 30 nmol.

Pedido do Primers Oligos

LightCycler®/HybProbes – LCPs

Following the concept of fluorescence resonance energy transfer (FRET), metabion synthesizes LightCycler® (LC®) probes in an ISO-certified manufacturing facility using processes licensed by Roche. We offer LC®probes in 7 different scales at defined molar amounts.

Introduced to the market in 1997, Light Cycler technology has become increasingly popular in various areas, from research to diagnostics.

The LightCycler® hybridization probe system is based on two oligonucleotide probes that hybridize, in a head-to-tail arrangement, to adjacent sequences of target DNA (hybridization assays). Each probe carries a different marker dye, the first 3’Fluo, the second 5’LC®610, 5’LC®640, 5’LC®670 or 5’LC®705. In addition, the 3’OH terminus of the LC® probes is “capped” by a phosphate group to prevent the polymerase from extending the primer during the PCR reaction.

As the marker dyes are in close proximity, fluorescence resonance energy transfer between them takes place which allows a specific and quantitative real-time detection of the amplification of a nucleic acid template. To avoid sterical problems between the 3′ Fluo and 5′ LC® Red end labels of the probes there should be a spacer of 1 to 5 nucleotides (4 to 25 Å distance) to separate the two probes from each other.

metabion synthesizes LC® probes in an ISO-certified manufacturing facility using processes licensed by Roche. We offer LC®probes in 7 different scales at defined molar amounts.

• These fluorophores can be positioned internally and at the 5′ or 3′-end, to produce dual or multiple labelled probes.
• We offer LC® probes with a maximum length of 40 nucleotides in guaranteed delivered quantities between 1 and 30 nmol. Our service includes HPLC and Mass Check.
• For larger quantities, contact us!

For your convenience, the LightCycler©/HybProbes Flyer is available for download.